碱性蛋白酶,又称丝氨酸蛋白酶。常见的有两种,一为Novo蛋白酶,另一为Carsberg蛋白酶,两者的性质和构造相近,分别含275和274个氨基酸残基,由一条多肽链构成。在pH6~10下稳定,低于6或大于11时很快失活。其活性中心含丝氨酸,故称丝氨酸蛋白酶 [1] 。它不但能水解肽键, 还具有水解酰胺键、酯键以及转酯和转肽的功能。由于酶的专一性,它只能对蛋白质水解,不能作用于淀粉、脂肪等物质。
蛋白酶广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。微生物蛋白酶,主要由霉菌、,其次由酵母、放线菌生产。
催化蛋白质水解的酶类。种类很多,重要的有、胰蛋白酶、组织蛋白酶、木瓜蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶等。蛋白酶对所作用的反应底物有严格的选择性,一种蛋白酶仅能作用于蛋白质分子中一定的肽键,如胰蛋白酶催化水解碱性氨基酸所形成的肽键。蛋白酶分布广,主要存在于人和动物消化道中,在植物和微生物中含量丰富。由于动植物资源有限,工业上生产蛋白酶制剂主要利用枯草杆菌、栖土曲霉等微生物发酵制备。
蛋白酶已广泛应用在皮革、毛皮、丝绸、、食品、酿造等方面。皮革工业的脱毛和软化已大量利用蛋白酶,既节省时间,又改善劳动卫生条件。蛋白酶还可用于蚕丝脱胶、肉类嫩化、酒类澄清。上可作药用,如用消化不良,用酸性蛋白酶,用惮性蛋白酶脉管炎以及用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶对化脓性创口的净化及胸腔间浆膜粘连的。加酶洗衣粉是洗涤剂中的新产品,含碱性蛋白酶,能去除衣物上的血渍和蛋白污物,但使用时注意不要接触皮肤,以免损伤皮肤表面的蛋白质,引起皮疹、等现象。
假定降解主要在生理pH下发生,所以金属蛋白酶和丝氨酸蛋白酶将处于其功能能力。在局部酸性环境中,半胱氨酸蛋白酶(组织蛋白酶B、H、L和S)和天冬氨酸蛋白酶(组织蛋白酶D)在酸性pH下作用于细胞外时具有活性,尽管在胶原片段的吞噬作用之后,它们的主要作用可能在细胞内的溶酶体内。然而,它们的相对作用却随着环境的不同而有所不同,并且它们还能够协同作用于消化胶原蛋白。尽管一些过程通过原纤维片段的吞噬发生,但通常认为,细胞内消化不是吸收过程中的关键事件。
针对蛋白质酶解的蛋白质酶有很多种,如,木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶,通过多种来源蛋白酶的协同效应,能进一步提高原料蛋白的利用率和成分。同时通过控制酶解时间、控制水解度、肽的分子量分布、是蛋白酶酶解技术加工过程中需要重点关注关键点。酶解后处理过程也很重要,因为生产原料或者生产过程中会有苦味、腥味或者颜色不美观,一般可通过如美拉德反应、活性碳脱苦、等物理方法进行风味提升和脱色脱腥。
(蛋白酶K)是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶,其相对分子量约为29.3 kDa,可切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键,应用广泛,可用于制备脉冲电泳的染色体DNA,蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶等实验,变性剂如SDS(1%)可提高其活性,常用工作浓度为50-100µg/ml,根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、pH、温度等因素确定具体的工作浓度。
碱性果胶酶能有效分解去除果胶质及其它共生物杂质,是一种比较理想的生物精练和煮练酶,被广泛应用于棉及其交织或混纺纤维、纱线和织物的各种前处理工序,还可用于麻类脱胶。
酶活定义
在50℃,pH9条件下,1分钟使聚半乳糖醛酸裂解产生1μ的不饱和聚半乳糖醛酸的酶量。
酶活构成
碱性果胶酶(主要包括原果胶酶,裂解酶和果胶水解酶)
酶活力
碱性果胶酶(固体)>7000U/g
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